살코기 검출 문제
현재 살코기를 검출하는 방법은 크게 네 가지가 있다. 즉, 고성능 액상색보법 (HPLC), 기색보일스펙트럼법 (GC-MS), 모세관구역 전기영동법 (CE), 면역분석기술 (IA) 이다. 우리나라는 자신의 실제 상황과 결합해 2001 년 농업부가 먼저 사료 중 염산 크렌트로의 측정 기준을 제정했다. 이 표준 선택은 두 가지, 즉 고효율 액상색보법 (HPLC), 기색보일질량 (GC-MS) 을 결정합니다. 그 중에서도 HPLC 방법을 살코기 검출을 위한 반확증 방법으로 꼽았으며, 최소 검출 한계는 0.05μ G/KG 로 제한되어 있어 검출 정확도가 높고 위양성률이 낮다는 장점이 있다. 단점은 검사 과정이 번거롭고, 검사 시간이 길어서, 귀중한 기구가 필요하고, 조작하기 어렵고, 가격이 비싸다는 것이다. GC 1 MS 법의 장점은 여러 잔류물이 동시에 존재하는 경우 특정 잔류물에 대해 정성, 정량 분석을 할 수 있다는 점이다. GC-MS 방법은 HPLC 법보다 감지 민감도가 높고 위양성률이 낮으며 GC-MS 를 살코기 검출의 확증 방법으로 정했습니다. GC－MS 방법의 단점은 HPLC 와 유사합니다. (1) 시약 및 재료 아래의 모든 시약, 특별히 명시된 경우를 제외하고 순수 시약 분석입니다. 물은 GB/T6682 규정에 부합하는 2 차 물이다. ① 염산 크렌테로 비교품: 염산 크렌트로를 함유한 것은 98.5% 이상이어야 한다. ② 염산 ③ 무수메탄올 ④ 수산화나트륨 ⑤ 인산이수소 칼륨 ⑥ 인산 ⑥ 인산 4．2ml 염산용액을 1000ml 에 넣으면 된다. ⑧ O.5MOL/L 인산이수소 칼륨 용액은 인산이수소 칼륨 68g 를 취하고, 물 800ml 을 넣어 용해하고, 인산조 pH 를 3.O 로, 물로 1000ml 로 희석하면 된다. ⑨ 0.05mol 인산이수소 칼륨 용액은 인산이수소 칼륨 6.88 을 취하고, 물 800ml 을 넣어 용해하고, 인산조 pH 를 3.0 으로, 물로 1000mi 까지 희석하면 된다. A. 수산화나트륨 용액은 수산화나트륨 48 을, 물을 넣어 100mi 로 용해하면 바로 얻을 수 있다. B. 염산 크렌테로 대조품 비축액 (1MG/MI) 은 정확히 28．3mg 염산 크렌테로 대조정에서 25ml 양병으로, 메탄올로 용해되어 25ml 로 희석되어 1 년 동안 유효하다. ⑩ 염산 크렌테로 대조품 작업액 (10TTG/MI) 은 LMG/MI 비축액 o．5ml 에서 50mi 양병에 물을 넣어 50mi 로 2～8~C 8 ~ C 로 보관해 1 개월간 유효하다. ⑵ 염산 크렌테로 제어 용액 (100NG/M1) 은 1 (UG/M1 작동액 o．5ml ~: 50mi 물병 ~ 50mi, 2～8~C 8 ~ C 보존, 1 개월 유효. ⑶ 염산 크렌트로 검사 테스트 키트 (2～8~C 8 ~ C 냉장고에 보관) ⑶ 고체상 추출 기둥 C, S: 100MG LML 탄소 함유량 ≥ 17% (2) 기기 및 장비 ① 효소 결합 면역 반응 판독 장치 ② 분석 저울 정확도 0．00001g ③ 저울 정확도 0．01g ④ 냉동 원심 분리기 ⑤ 50ul 다도 50 ~ 250UL, ⑵건열 농축기 ① 공기압축기 (3) 측정 단계 ① 시료의 제비 (소변) 를 시뇨LML 로, 3000r／min 원심 l0min, 상청액을 시험재로, 효소 연쇄 면역 측정법으로 직접 측정한다. 빈 소변 lml 을 채취하여 3000r／min 원심 l0min, 상청액을 빈 시료로 직접 효소 연쇄 면역 측정법으로 측정한다. 빈 소변 2ml, 3000r／min 원심 l0min, 상청액 1.0ml 에 L00UG/L 의 크렌트로제어 용액 20/H 를 첨가합니다. 2ug/l 공백에 시료를 첨가하여 효소연합 면역측정법으로 직접 측정한다. ② 시료의 제비 (간) 는 약 l00g 신선하거나 냉동한 후 녹은 공백이나 시험돼지 간을 채취하고, 균장기로 10000r／rain 으로 1-2min 을 고르게 반죽하여 120 ~ C 이하의 냉장고에 보관한다. 균질 펄프를 채취한 후 간 샘플을 시험용 재료로 삼다.
균질화 후 빈 간 샘플을 빈 시험재로 취하다. 균질화 후 빈 간 샘플 (1 토 0.05) E 는 L00ng/M1 의 클렌틀로 대조 용액 20tzL 을 2NG/G 공백에 시료를 첨가한다. A: 추출 (간) 추출 (1 사 o.05) z 시험 재료, 50ml 원심 튜브 배치; 염산용액 5.0mi 를 첨가하고 소용돌이가 고르게 섞이고 중속 진동이 1．5h； 입니다. 10-15~C 에서 4000r／mill 이상의 속도로 15min； 을 원심합니다. 상청액은 다른 50ml 원심관에 수산화나트륨 용액 300gL 을 넣고 섞어서 15min； 을 진동시킵니다. 0.5mol/l 인산이수소 칼륨 용액 4 를 첨가하다. 0ml, 혼합, 2-8~C 밤새 배치; 상술한 용액을 10 ~ 15 ~ C 에서 4000r／111113 이상의 속도로 원심력 15min, 상청액 예비를 취하다. B. 정화 (간) c, 고체상 추출 기둥은 무수메탄올 3mi, 0.05mol/l 인산 이수소 칼륨 용액 2mi 로 미리 씻어서 기둥 침대를 말리지 않는다. 대기 상청액을 모두 기둥을 통과하다. 0.05MOL/L 인산이수칼륨 용액 2ml 로 헹구고 짜서 모든 로션을 버리세요. 무수메틸알코올 2mi 로 씻고 유속은 0.5ML/MM 이하로 조절하여 짜서 용리액을 수집한다. 50 ~ 60 ~ c 에서 질소나 공기로 세제를 천천히 말린다. 잔여물은 물 1.0ml 로 용해되어 4000r／mill 이상의 속도로 원심 15rain, 청액은 샘플 용액으로 효소 연합 면역 측정법으로 측정한다. ③ a. 실온은 19 ~ 30 ~ c 로 조절해야 한다. B. 19-30~C 에 1-2h 를 배치한 테스트 키트, 각 표준 용액 및 샘플 용액당 최소 두 개의 구멍으로 필요한 효소 연판 수를 계산하여 프레임을 삽입합니다. 각 미공마다 완충용액 100 배로 희석된 항체 100~tL, 봉막봉판, 실온에서 30min 을 부화한다. C 는 구멍 안의 액체를 쏟고 효소 연판을 물 흡수지에 거꾸로 두드려 구멍에 잔여물이 없도록 한다. 다도 이동기로 물 250pL 을 효소 연합판에 넣는 마이크로요? L 안에서는 나중에 구멍 안의 액체를 쏟은 다음 효소연합판을 물흡수지에 거꾸로 두드려 세판을 세 번 반복한다. D. 각각 표준용액, 공백 시료, 빈 첨가물, 시험용 재료 각각 20uL 을 흡수해 각각 다른 미공 밑바닥 중앙에 넣고, 각 구멍에 완충용액 100 배로 희석된 효소 결합물 100~I 를 넣는다. , 마이크로 발열기에 섞어서 봉구막으로 봉하여 실온에서 30min 을 부화시킵니다. E. 구멍 안의 액체를 쏟고 효소연합판을 흡수지에 거꾸로 두드려 구멍에 잔여물이 없도록 세판을 세 번 반복한다. F. 다도이동기로 밑물 완충액 10 배로 희석된 밑물 100uL 을 넣고 실온에서 빛을 피하고 15min 을 부화시킵니다. G. 다중 채널 피펫을 사용하여 구멍 당 종료 유체 100uL 을 추가하십시오. H. 1h 내에서 효소연합판을 효소 표지기에 넣고 450nm 파장에서 흡광도 값을 측정한다. (4) 계산은 데이터 분석 소프트웨어를 사용하여 결과를 분석하고, 표준 곡선을 그리고, 시제품 중 크렌트로의 함량을 산출한다. (5) 민감도 및 회수율 이 방법의 평균 검출 하한은 0.1MG/KG 입니다. 이 방법은 1UG/KG 첨가 농도 수준에서 돼지 소변 회수율 범위는 60% 1 120%, 돼지 간 회수율 범위는 40% ~ 120% 입니다. 참고 자료 baidu/ baidu